Determinação fenotípica das haptoglobinas em pacientes com dor crônica causada por desordens temporomandibulares

 

Haptoglobin phenotypic determination in patients with chronic pain caused by temporomandibular disorders

 

 

Norberto Perri Moraes^I; Maria Margareth Theodoro Caminhas^II; João Paulo De Carli^III; Soluete Oliveira da Silva^IV; Maria Salete Sandini Linden^V; Micheline Sandini Trentin^VI; Rejane Eliete Luz Pedro^VII

^IProfessor Titular do Departamento de Patologia e Propedêutica Clínica, disciplina de Estomotologia - Faculdade de Odontologia de Araçatuba/SP/Unesp
^IIProfessora Assistente Doutora de Genética Animal do Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal - Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba/ SP/Unesp
^IIIMestre em Estomatologia pela Unesp de Araçatuba - SP, aluno do curso de doutorado em Estomatologia pela PUCPR e professor Assistente da Faculdade de Odontologia da UPF
^IVDoutora em Estomatologia Clínica pela PUCRS, professora Titular da Faculdade de Odontologia da UPF
^VDoutora em Implantodontia pela SL Mandic/Campinas/SP, professora Titular da Faculdade de Odontologia da UPF
^VIDoutora em Periodontia pela Unesp de Araraquara - SP, professora Adjunta da Faculdade de Odontologia da UPF
^VIIMestra e aluna do curso de doutorado em Gerontologia da PUCRS

Endereço para correspondência

 

 

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RESUMO

Os fenótipos do sistema hemoglobina-haptoglobina (Hb-Hp) foram determinados em 124 indívíduos, dos quais cem eram pacientes portadores de algia crônica por desordens temporomandibulares (DTMs) e 24 normais, sem nenhuma dor corporal, durante os anos de 2000-2003. O sistema Hb-Hp apresentou polimorfismo Hp1-1, Hp2-1 e Hp2-2, respectivamente, em 100 e 85%, e anahaptoglobinemia (Hp 0) em 15% da amostra estudada. O genótipo Hp1-1 esteve presente significativamente (p < 0,0001) em pacientes com DTMs, independentemente do tipo clínico da DTM diagnosticada, podendo sugerir a Hp1-1 como provável marcador genético de suscetibilidade para o desenvolvimento de algias crônicas por DTMs.

Palavras-chave: Articulação temporomandibular. Dor. Haptoglobina. Polimorfismo genético.

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ABSTRACT

The phenotypes of the hemoglobin-haptoglobin (Hb-Hp) system were measured in 124 subjects, 100 patients with chronic pain in temporomandibular disorders and 24 normal, without any bodily pain during the years 2000 -2003. The system Hb-Hp showed polymorphism Hp1-1, Hp2-1 and Hp2-2, at 100% and 85% respectively; anahaptoglobinemia (Hp0) in 15% of the sample studied. Hp1-1 genotype was present significantly (p < 0, 0001) in patients with TMDs, regardless the clinical type TMD, suggesting that Hp1-1 and likely genetic marker of susceptibility for the development of chronic pain in TMD.

Key words: Temporomandibular joint. Pain. Haptoglobin. Polymorphism genetic.

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Introdução

Na associação entre doenças e genética destaca-se o estudo eletroforético do polimorfismo genético bioquímico do sistema hemoglobina-haptoglobina associado à suscetibilidade a infecções, inflamações e neoplasias, além de ser um método laboratorial de baixo custo^1-6.

A haptoglobina é uma proteína ligada à hemoglobina (sistema Hb-Hp) que apresenta propriedades antioxidantes e imunomodulatórias^7-9. A função principal da haptoglobina é impedir a perda da hemoglobina em nível renal por meio da formação do sistema Hb-Hp, que é estruturalmente estável e de grande tamanho, portanto não atravessa a membrana glomerular¹. O sistema Hb-Hp, sendo estável e estando presente dessa forma na circulação sanguínea, permite o estudo bioquímico dos seus níveis séricos em diferentes abordagens de pesquisa, incluindo os estudos genéticos. No homem existe o polimorfismo genético da cadeia alfa com três principais genótipos: Hp1-1, Hp1-2 e Hp2-2¹; determinados por dois genes codominantes, Hp1 e Hp2, localizados no cromossomo 16q22^10,11.

Na região bucofacial, enfermidades desenvolvem dor crônica ou persistente durante três a seis meses^12-14. Dentre as dores crônicas da região bucofacial, as desordens temporomandibulares (DTMs) são motivo de queixa de grande número de pacientes no consultório odontológico^15-18. Foi constatado que 6% da população civil americana (10,8 milhões de pessoas) apresentaram dores na região da articulação temporomandibular (ATM) ou na face/bochecha nos últimos seis meses, sintomas que estavam comumente associados às DTMs¹⁹.

É propósito deste trabalho estudar a possível base genética no desenvolvimento das DTMs por meio do estudo genético-bioquímico eletroforético da haptoglobina de pacientes acometidos por algia crônica ocasionada por desordens temporomandibulares. Dessa forma, este trabalho caracterizou o padrão eletroforético do complexo hemoglobina-haptoglobina em pacientes com algia crônica por DTMs e em indivíduos normais, sem nenhuma dor corporal; além disso, pesquisou possíveis associações entre o polimorfismo do complexo hemoglobina-haptoglobina e a algia crônica por DTMs.

 

Sujeitos e método

O presente trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Faculdade de Odontologia de Araçatuba (protocolo nº 2007-00151).

Foram coletados, em seringas heparinizadas, 0,5 mL de sangue total venoso de 124 indivíduos adultos, selecionados aleatoriamente quanto a gênero, idade e raça. Esses foram divididos em: Grupo I - 100 indivíduos portadores de algia crônica por DTMs, registrados no Serviço de Dor Orofacial do Centro de Oncologia Bucal (COB) e na Clínica de Estomatologia da Faculdade de Odontologia de Araçatuba/Unesp; Grupo II - 24 indivíduos voluntários, formado por alunos e docentes da Unesp/Campus de Botucatu, sem nenhuma dor corporal.

O diagnóstico das DTMs baseou-se principalmente na análise conjunta dos dados da história da doença, sinais e sintomas, além dos achados dos exames radiográficos de rotina^12,14,17,20.

A determinação dos fenótipos do sistema Hb-Hp foi feita no Laboratório de Genética da Faculdade de Medicina Veterinária da FOA/Unesp por meio de eletroforese horizontal¹; modificando o meio suporte para ágar-amido²¹.

 

Resultados e discussão

O estudo clínico revelou como resultado de maior significado os seguintes tipos clínicos diagnosticados de DTMs: artralgia (sinovite, capsulite, retrodiscite), em 94% dos casos; artralgia associada a deslocamento do disco sem redução e desordem miofacial, em 25% dos casos; artralgia associada ao deslocamento do disco sem redução, desordem miofacial e desordem espinocervical, em 20% dos casos (Fig. 1).

 

 

Os resultados do estudo laboratorial do polimorfismo genético bioquímico do sistema hemoglobina-haptoglobina demonstraram que o genótipo HbA-A esteve presente em 95,96% da amostra e o genótipo HbA-B, em 4,04% (Fig. 2); o genótipo Hp1-1 esteve presente significativamente (p < 0,0001) em 85,48% da amostra e em 100% dos pacientes estudados, independentemente do tipo clínico da DTM diagnosticada. O gene Hp1 prevaleceu nas mulheres (77 casos no gênero feminino e 8 no masculino) e na raça branca (69 casos). A anahaptoglobinemia (Hp0) foi detectada em 14,52% da amostra (14 mulheres e 4 homens) e com maior frequência na raça branca (10,48%).

 

 

Os genótipos Hp2-1 e Hp2-2 foram detectados, respectivamente, em 8,87% e 3,23% dos indivíduos e apenas no grupo de controle. Entretanto, no grupo de pacientes com algia crônica por desordens temporomandibulares houve o monomorfismo para o sistema Hb-Hp e para a haptoglobina Hp1-1 em indivíduos do gênero feminino e da raça branca, independentemente do tipo clínico da DTM. Sugere-se, portanto, que a haptoglobina Hp1-1 participa da etiopatogenia da algia crônica por desordens temporomandibulares.

Neste trabalho, no que se refere à condição de se ter o genótipo Hp1-1 como associado à suscetibilidade para o desenvolvimento de DTMs, encontra-se respaldo na literatura consultada, visto que muitos autores sugerem o polimorfismo da haptoglobina com determinados genótipos como marcadores de suscetibilidade a infecções, inflamações e processos degenerativos. As leucemias, a artrite reumatoide juvenil e as talassemias do tipo beta mostraram-se associadas significativamente à haptoglobina¹; e o genótipo Hp1-1, associado à cirrose hepática²². Em pacientes coronarianos, o genótipo Hp2-2 é um fator angiogênico positivo, ao passo que o genótipo Hp 1-1 apresenta maior risco de mortalidade coronariana, obesidade e diabetes^23-25; o que foi confirmado por outros autores^5,25. Diabéticos com o genótipo Hp 2-2 apresentaram significativamente mais nefropatias, retinopatias e doenças cardiovasculares do que diabéticos com os genótipos Hp1-1 e Hp1-2^25,26.

O gene Hp1 foi associado significativamente com alguns tipos de tumores: câncer ovariano^27,28; tumores mamários malignos (associados ao genótipo Hp1-1), carcinomas de cérvix (associados ao Hp1-2)²⁹; adenocarcinoma de pulmão (mulheres com o genótipo Hpt1-1)³⁰; câncer de esôfago (genótipo Hpt 1-2), cânceres gástrico³¹; renal³² e de bexiga³³ (associados ao genótipo Hpt 1-1) e câncer de pulmão em pacientes sem histórico familial (associado ao genótipo Hp2-2)³⁰. Sugeriu-se⁵ o genótipo homozigoto haptoglobina Hp1-1 como marcador para a osteoporose pós-menopausa em mulheres. Em estudos com pacientes com leucemia, nenhuma associação foi verificada entre leucemia com Hp1-1, como sugere a literatura; entretanto, observou-se maior prevalência de haptoglobinêmicos entre os pacientes leucêmicos³⁴.

Os resultados deste trabalho vêm se somar àqueles da literatura, que sugerem uma possível base genética na etiopatogenia das desordens temporomandibulares. Por exemplo: a matriz extracelular da cartilagem da ATM é muito afetada por atividades celulares, incluindo-se a expressão gênica^24,35; existe uma provável base genética no desenvolvimento dos processos inflamatórios e degenerativos da ATM em alguns pacientes³⁶.

A base genética para as DTMs também encontra suporte no estudo etiológico da artrite reumatoide, na medida em que há evidências não só do papel imunológico e neural no seu desenvolvimento, como da participação do fator genético na sua etiopatogenia, considerando-se que a artrite reumatoide é, dentre as doenças artríticas, a que mais acomete a ATM de pacientes com desordens temporomandibulares^37,38.

Neste trabalho, quanto à constatação da prevalência da Hp1-1 em mulheres, indicando monomorfismo para Hp1 para as mulheres da amostra estudada, encontra-se suporte na literatura³⁹ quando se deduz que raça branca e gênero feminino seriam significativamente prevalentes na DTM por osteoartrite secundária em razão de uma predisposição genética, e nos informes da Ciba Collection⁴⁰; ao afirmarem que um gene dominante nas mulheres e recessivo nos homens poderia estar envolvido na herança da osteoartrite. Portanto, sugere-se no presente trabalho que Hp1 represente um gene dominante para mulheres e recessivo para homens quando na presença de algia crônica por desordens temporomandibulares.

No referente ao estudo haptoglobina versus raça, há variação das frequências dos genes Hp1, Hp2 e ausência de haptoglobina (anahaptoglobinemia) ou ocorrência de deleção do gene promotor da cadeia alfa Hp1¹⁰ entre as raças humanas^1,41. Existe prevalência do gene Hp1 em negros da África, seguidos de leucodermas da Europa e amarelos da Ásia; há também subtipos de Hp1 (HpF e HpS) em indígenas mexicanos⁴².

No presente trabalho constatou-se que o genótipo Hp1 (91 casos) esteve presente na raça branca (75 casos; 60,48%), seguido da raça negra (13 casos; 10,48%), da amarela (2 casos; 1,61%) e vermelha (1 caso; 0,81%).

A ana-haptoglobinemia apresentou-se em 18 casos, sendo 13 na raça branca, quatro na negra e uma na amarela.

Quanto à haptoglobina versus história familial, houve correlação positiva entre Hp1-1 e história familial para dores na face e artrite reumatoide (27 casos, correspondendo a 90% dos casos de história familial positiva), indicando evidência da participação genética do sistema Hb-Hp no desenvolvimento das DTMs.

 

Conclusão

O monomorfismo da haptoglobina Hp1 esteve presente em 85% dos pacientes (mulheres da raça branca) com DTMs, independentemente do tipo clínico da DTM diagnosticada. Isso sugere a haptoglobina Hp1-1 como um provável marcador genético de suscetibilidade para o desenvolvimento de algia crônica por DTMs. O método genético-bioquímico eletroforético do sistema Hb-Hp mostrou-se válido para o estudo da etiopatogenia genética das DTMs, além de ser de baixo custo, simples e bem aceito pelo paciente. Finalizando, sugere-se que novos estudos nesta linha sejam realizados para melhor compreender os resultados obtidos neste trabalho.

 

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Recebido: 28.09.2009
Aceito: 20.11.2009