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Revista Odonto Ciência (Online)
ISSN 1980-6523
Rev. odonto ciênc. (Online) vol.25 no.1 Porto Alegre ene. 2010
ORIGINAL ARTICLE
Quality evaluation of DNA obtained from stored human saliva and its applicability to identification in Forensic Dentistry
Avaliação da qualidade do DNA extraído de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade na identificação em Odontologia Legal
Suzana Papile Maciel CarvalhoI; Arsenio Sales-PeresII; Lucilene Arilho Ribeiro-BicudoIII; Ricardo Henrique Alves da SilvaIV
IDoutorado em Odontologia Social, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil
IIFaculdade de Odontologia de Bauru, Universidade de São Paulo, Bauru, SP, Brasil
IIIHospital de Reabilitações de Anomalias Crânio-faciais de Bauru, Universidade de São Paulo, Bauru, SP, Brasil
IVFaculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, SP, Brasil
ABSTRACT
PURPOSE: This study evaluated the quality of DNA obtained from stored human saliva and its applicability to human identification.
METHODS: The saliva samples of 20 subjects, collected in the form of saliva in natura and from mouth swabs and stored at -20ºC, were analyzed. After 7 days, the DNA was extracted from the 40 saliva samples and subjected to PCR and electrophoresis. After 180 days, the technique was repeated with the 20 swab samples.
RESULTS: The first-stage results indicated that DNA was successfully extracted in 97.5% of reactions, 95% of saliva in natura and 100% of swab saliva samples, with no statistically significant difference between the forms of saliva. In the second phase, the result was positive for all 20 analyzed samples (100%). Subsequently, in order to analyze the quality of the DNA obtained from human saliva, the SIX3-2 gene was tested on the 20 mouth swab samples, and the PCR products were digested using the MbO1 restriction enzyme to evaluate polymorphisms in the ADRA-2 gene, with positive results for most samples.
CONCLUSION: It was concluded that the quantity and quality of DNA from saliva and the techniques employed are adequate for forensic analysis of DNA.
Key words: Human identification; Forensic Dentistry; Forensic Medicine; DNA; molecular biology; saliva
RESUMO
OBJETIVO: Este trabalho objetivou avaliar a qualidade do DNA obtido de saliva humana armazenada e sua aplicabilidade da identificação de pessoas.
METODOLOGIA: Analisaram-se amostras salivares de n=20 sujeitos da pesquisa, coletadas nas formas de saliva in natura e de swab bucal, sendo armazenadas a 20ºC. Após 7 dias, o DNA foi extraído das 40 amostras de saliva e submetido à PCR e à eletroforese. Após 180 dias repetiu-se a técnica nas 20 amostras de swab.
RESULTADOS: Os resultados da primeira etapa indicaram que o DNA foi extraído com sucesso em 97,5% das reações, e, analisando-se separadamente, em 95% de saliva in natura e em 100% da saliva do swab, não havendo diferenças estatisticamente significantes entre as duas formas de saliva. Na segunda fase, o resultado foi positivo para as 20 amostras analisadas (100%). Posteriormente, para analisar a qualidade do DNA obtido da saliva humana, o gene SIX3-2 foi testado nas 20 amostras de swab bucal e foi feita a digestão do produto da PCR com a enzima de restrição MbO1 para avaliar polimorfismo do gene ADRA-2 obtendo-se resultados positivos para a maioria das amostras.
CONCLUSÃO: Concluiu-se que a quantidade e a qualidade do DNA advindo de saliva e as técnicas empregadas estão adequadas à análise forense do DNA.
Palavras-chave: Identificação humana; Odontologia Legal; Medicina Legal; DNA; biologia molecular; saliva
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Correspondence:
Suzana Papile Maciel Carvalho
Rua Christiano Pagani, 8-51, Apto. 61B,
Vila Engler Bauru, SP
rasil 17047-144
E-mail: sumaciel@uol.com.br
Received: March 23, 2009
Accepted: November 16, 2009
