Ação antibacteriana e antiaderente de pithecellobium Cochliocarpum (gomez) macbr sobre microrganismos orais

Antimicrobial and antiadherent activity ofpithecellobium cochliocarpum (gomez) macbr testedon oral microorganisms

Renata Patrícia Freitas Soares de Jesus^I; Maria Regina Macedo Costa^II; Isla Vanessa Bastos^III; Geraldo Bosco Lindoso Couto^IV; Maria do Socorro Vieira Pereira^V; Ivone Antônia de Souza^VI

^IDoutoranda em Ciências Farmacêuticas pela UFPE
^IIMestranda em Odontologia Social pela UFPB ]]> ^IIIMestranda em Ciências Farmacêuticas pela UFPE
^IVProfessor Adjunto do Departamento de Clínica e Odontologia Preventiva da UFPE
^VProfessora Adjunta do Departamento de Biologia Molecular da UFPB
^VIProfessora Adjunta do Departamento de Antibióticos da UFPE

Endereço para correspondência

RESUMO

O biofilme dental é o fator de maior importância na etiologia da cárie e das doenças periodontais. Diversos produtos de origem vegetal mostraram ser potencialmente interessantes no que se refere a sua atividade antimicrobiana. O objetivo do estudo foi o de avaliar a atividade antibacteriana e antiaderente do Pithecellobium cochliocarpum (Gomez) Macbr. (babatenon) frente Streptococcus mutans, S. sanguinis, S. salivarius, S. mitis, S. oralis e Lactobacillus casei. Para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), os ensaios foram realizados em triplicata, em meio sólido, através da técnica de Ágar-Difusão em placas de Petri. Em relação à determinação da Concentração Inibitória Mínima de Aderência (CIMA) da bactéria ao vidro na presença de sacarose a 5%, utilizou-se a técnica dos tubos inclinados. Em estudo comparativo, foi determinada a CIM e a CIMA do digluconato de clorexidina a 0,12%. Quanto à CIM, o Pithecellobium cochliocarpum apresentou atividade antibacteriana similar ao digluconato de clorexidina frente a todas as linhagens ensaiadas. Os halos variaram entre 10 a 30mm com resultado destacado (até a diluição 1:512) frente a S. sanguinis, S. oralis e L. casei. Já a CIMA frente ao babatenon mostrou-se efetivo na inibição da aderência até a última diluição considerada (1:512) para S. sanguinis, S. mitis e S. oralis, apresentando desempenho médio superior à clorexidina. Conclui-se que o Pithecellobium cochliocarpum apresentou potencial atividade antimicrobiana e antiaderente, ressaltando a importância de se avaliar um agente fitoterápico mais acessível à população com perspectiva da prescrição nos serviços de Atenção Básica, estando em consonância com as novas diretrizes do Ministério da Saúde.

Descritores: Pithecellobium cochliocarpum; Atividade antimicrobiana; Atividade antiaderente.

The dental biofilm is the major factor in the etiology of caries and periodontal diseases. Several plant products have shown to be potentially interesting with regard to its antimicrobial activity. The aim of this study was to evaluate the antibacterial and adherent the ethanol extract of Pithecellobium cochliocarpum (Gomez) Macbr (babatenon) front Streptococcus mutans , Streptococcus sanguinis , Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis and Lactobacillus casei. To determine the minimum inhibitor y concentration (MIC) tests were perfomed in triplicate on solid medium, using the technique of Agar Diffusion in petri dishes relation to determining the minimum inhibitory concentration of adherence (CIMA) of the bacteria to glass in the presence of sucrose at 5%, we used the technique of inclined tubes . In a comparative study, it was determined the CIM and CIMA values of chlorhexidine 0.12%. As for CIM, Pithecellobium cochliocarpum showed antibacterial activity similar to chlorhexidine gluconate against all strains tested. The zones ranged from 10 to 30 mm with outstanding results (up to dilution 1:512) against S. sanguinis, S. oralis and L. casei. Already the CIMA in relation the babatenon was effective in inhibiting adhesion to the last dilution was considered (1:512) for S. sanguinis, S.oralis and S. mitis, showing average performance than chlorhexidine. It is concluded that Pithecellobium cochliocarpum showed significant antimicrobial activity and antiadherent emphasizing the importance of evaluating an agent herbal medicine more accessible to people with perspective of the prescription in primary care services, and in line with new guidelines from the Ministry of Health.

Keywords: Abarema cochliocarpa, antimicrobial activity, antiadherent activity.

INTRODUÇÃO

As infecções humanas, particularmente aquelas que envolvem a pele e mucosas, constituem um sério problema, especialmente em países desenvolvidos tropicais e subtropicais. As plantas têm sido valorizadas como produtos naturais importantes para a manutenção da saúde , especialmente na última década, com a realização de muitos estudos sobre terapias naturais¹. O importante crescimento mundial da fitoterapia dentro de programas preventivos e curativos tem estimulado a avaliação da atividade de diferentes extratos de plantas para o controle do biofilme dental bem como de outras afecções bucais. Inúmeros trabalhos vêm sendo realizados par a avaliação de espécies vegetais na Odontologia^{2,3, 4,5}.

O Brasil apresenta um grande potencial para o desenvolvimento da Fitoterapia, inclusive no que se refere à Odontologia, vinculado ao conhecimento tradicional e tecnologia para validar cientificamente este esclarecimento⁶. Atualmente a Fitoterapia faz parte do Sistema Único de Saúde, sendo possível a sua inclusão médica e odontológica^7,8.

Pithecellobium cochiliocarpum ( Gomez) Macbr é uma árvore de grande porte endêmica do Brasil pertencente Leguminosae-mimosaceae, encontrada na Mata Atlântica. Sua decocção tem sido amplamente utilizada pela população devido a sua propriedade antisséptica, cicatrizante, anti-inflamatória, analgésica e antiulcerogênica⁸. É conhecida popularmente como babatenon, babatimão ou barbatimão. Estudos fitoquímicos relatam a presença de saponinas, flavonoides, catequinas e terpenos. Poucos estudos têm demonstrado suas atividades biológicas. Estudo realizado com o extrato hidroalcoólico das cascas de P. cochliocarpum demonstrou atividade antibacteriana em cepas Gram-positivas^{9, 10}.

Em virtude da biodiversidade presente nos diferentes biomas brasileiros, existe uma crescente demanda para produtos naturais que impulsionam as investigações científicas e a busca por drogas naturais. Assim, o objetivo deste estudo foi o de verificar a ação antimicrobiana e antiaderente do extrato das cascas de P. cochliocarpum (Gomez) Macbr frente a Streptococcus mutans, S. sanguinis, S. salivarius, S. mitis, S. oralis e Lactobacillus casei.

MATERIAIS E MÉTODOS

Material Botânico e obtenção do extrato

Amostras de P. cochliocarpum foram coletadas no NUPA (Núcleo de Pesquisa e Processamento de Alimentos/ UFPB) em João Pessoa – PB e posteriormente identificadas pela botânica Dra. R ita de Cássia de A. Pereira. Uma ex cicata foi depositada no herbário "Prof. Lauro Pires Xavier", da Universidade Federal da Paraíba, sob o número 61.336. O processo de secagem foi efetuado em temperatura ambiente, durante 24 horas. Em seguida, foi colocado na estufa a 33ºC, durante uma semana, sendo, posteriormente, triturada a pó . A extração foi realizada em álcool etílico 95% (p/p) e, após uma semana de maceração, foi obtido o ex trato bruto por filtração. Este foi evaporado em rotavapor a 40ºC, obtendo-se resíduo escuro e higroscópico.

Cepas Bacterianas

Utilizaram-se, neste estudo, linhagens bacterianas padronizadas de Streptococcus mitis A TCC 903, Streptococcus sanguinis A TCC 15300, Streptococcus mutans ATCC 25175, Streptococcus salivares ATCC 7073, S. oralis ATCC 10557 e Lactobacillus casei ATCC 9595, obtidas mediante solicitação na Fundação Tropical de Pesquisas e Tecnologia "André Tozello" ( Campinas- SP) e Instituto Adolfo Lutz (São Paulo- SP), respectivamente. Foram replicadas em Agar Sangue inclinado (" slants"), e , posteriormente, estocadas, repicadas no Laboratório de Genética de Microrganismos – Departamento de Biologia Molecular/CCEN, da Universidade Federal da Paraíba.

Determinação da Atividade Antimicrobiana do Extrato de Pithecellobium cochliocarpum.

A atividade antimicrobiana em placas foi determinada pelo método de difusão em meio sólido , para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) do extrato etanólico de P. cochliocarpum (EEPc) sobre as linhagens bacterianas. As linhagens foram cultivadas em caldo nutritivo (BHI-Brain Heart Infusion-DIFCO) e incubadas a 37ºC por 18-20 horas em microaerofilia. Foram realizadas perfurações no meio de cultura (Agar Mueller Hinton – DIFCO, acrescido de sacarose a 5%) de aproximadamente 6mm de diâmetro. Nos orifícios , colocou-se um volume de 50 µl da solução do extrato diluído, variando de 1:1 a 1:5 ¹². A s placas foram incubadas em estufa bacteriológica a 37ºC por um período de 24 horas. Os mesmos procedimentos foram realizados com o gluconato de clorexidina a 0,12% (controle positivo). Cada ensaio foi realizado em duplicata frente a cada linhagem selecionada. Foi considerada como CIM a menor concentração do extrato que inibiu completamente o crescimento bacteriológico.

Determinação da Concentração Inibitória Mínima de Aderência

A concentração Inibitória Mínima de Aderência (CIMA) da bactéria ao vidro foi determinada na presença de sacarose a 5%, de acordo com Gerbara, Zardetto e Mayer (1996), usando -se concentrações crescentes e dobradas da solução diluída do extrato, variando de 1:1 a 1:5¹². A partir do crescimento overnight, as linhagens foram subcultivadas a 37ºC em caldo Müeller-Hinton (DIFCO), em microaerofilia, por um período de 40min, obtendo-se um inóculo de 106 UFC/ml . A incubação foi a 37ºC por 24 horas em microaerofilia, com os tubos inclinados a 30º. Os mesmos procedimentos também foram realizados com o gluconato de clorexidina a 0,12% (controle positivo). Cada ensaio foi realizado em duplicata frente a cada linhagem selecionada. A CIM A foi definida como a menor concentração do agente antibacteriano que impediu a aderência bacteriana ao tubo de vidro.

Os resultados obtidos no teste da Concentração Inibitória Mínima foram coletados, organizados e apresentados em forma de tabelas com os seus respectivos valores das médias dos halos , indicando a inibição do crescimento bacteriano. Posteriormente, os resultados obtidos foram transferidos para um banco de dados informatizado e calculado os parâmetros estatísticos que incluíram valores das respectivas medidas descritivas mínimo, máximo , média e desvio-padrão mediante o emprego do programa SPSS (Statistical Package for Social Sciences), versão 13.0. O nível de confiança utilizado para a obtenção dos intervalos foi de 95%. Utilizou-se, ao nível de 5% de significância, o teste t-Student (para duas amostras independentes) na comparação da inibição bacteriana mínima de cada extrato em relação ao digluconato de clorexidina a 0,12%. Para o seu uso , verificaram-se, inicialmente, as premissas de normalidade e igualdade de variâncias através dos seguintes testes: Kolmogorov-Smirnov (uma amostra) para normalidade e Levene para verificação da homogeneidade dos dados.

RESULTADOS

Os resultados da atividade antimicrobiana para a determinação da Concentração Inibitória Mínima em meio sólido com halos de inibição do extrato da casca de babatenon sobre S. mitis , S. mutans , S. sanguinis , S. oralis, S. salivarius e L. casei estão apresentados nas tabelas 1. Nesse ensaio , ficou demonstrado que todas as amostras utilizadas foram sensíveis ao extrato. Os halos de inibição variaram de 10 a 30mm.

A ação antimicrobiana foi homogênea para as linhagens ensaiadas, e a inibição do crescimento bacteriano diminuiu , conforme a redução na concentração do extrato, com a formação de halos de inibição a partir do extrato bruto até a última diluição do extrato (1:512) frente às amostras de S. sanguinis, S. oralis e L. casei. A Figura 1 expressa a ação antimicrobiana in vitro do extrato hidroalcoólico de P. cochliocarpum frente a uma amostra de S. aureus multiresistente.

Em relação aos ensaios da atividade antimicrobiana realizados com o digluconato de clorexidina a 0,12% (Tabela 2), todas as linhagens selecionadas foram inibidas pela ação dessa substância, como esperado . As linhagens de S. oralis, S. salivarius e L. casei foram as mais sensíveis, apresentando halo de inibição até a diluição 1:128; o padrão de sensibilidade é seguido por S. mutans Jesus RPFS, et al. e S. sanguinis, com halo de inibição até a diluição 1:32. O S. mitis, apresentou halo de inibição até a diluição 1:16.

Na tabela 3, ficou demonstrado que o EEP c apresentou atividade antiaderente em todas as cepas estudadas. O extrato etanólico de P. cochiliocarpum apresentou maior atividade antiaderente frente a todas as bactérias estudadas, quando comparado ao controle positivo (1:16), e atividade antiaderente maior frente ao S. sanguinis, S. oralis e S. mitis com CIMA de 1:512.

Admitiu-se normalidade para a Concentração Inibitória Mínima do extrato considerado (verificada através do teste não-paramétrico de normalidade de Kolmogo rov-Smirnov) e igualdade de variâncias populacionais (verificado através do teste de Levene) (Tabelas 4 e 5).

Conforme resultados do teste-t (tabela 6), o extrato de Babatenon teve desempenho médio superior ao Gluconato de clorexidina a 0,12% nas concentrações E1:8 a E1:128 quanto à concentração inibitória mínima ( CIM), entretanto houve diferença significativa apenas nas concentrações E1:64 (sig. p-valor < 0,05) e E1:128 (sig. p-valor < 0,01). A clorexidina apresentou média superior com as concentrações EB v s SP e E1:2, sendo , porém, estatisticamente não-significante.

DISCUSSÃO

As afecções odontológicas podem ser evidenciadas por sintomas característicos de diversas etiologias. Algumas dessas afecções vêm sendo tratadas com a fitoterapia, sendo algumas espécies vegetais indicadas nos casos de gengivite, abscesso na boca, inflamação e aftas ^{8, 11, 12, 13} . Porém, apesar das inúmeras possibilidades de uso de plantas medicinais por parte dos profissionais da área da saúde , seu uso na odontologia tem sido pouco explorado, seja para tratar doenças bucais ou para tratar doenças sistêmicas com manifestações bucais^{14,15, 16, 17}.

O biofilme dental é uma película de microrganismos que se desenvolve naturalmente sobre as superfícies dos dentes. Nas fases iniciais do seu processo de formação, o biofilme bacteriano necessita de polissacarídeos extracelulares, permitindo a adesão , interação e multiplicação das bactérias²².

Sabe-se que a adesão das bactérias às superfícies dentais constitui um processo complexo multifatorial, influenciado pelo ambiente bucal , morfologia dental , superfície bacteriana e hábitos do hospedeiro e superfície do substrato²⁴. De acordo com Pereira et al., (2006)17, vários fatores estão associados a esse processo, dentre estes, a interação de proteínas, adesinas, lectinas e interações hidrofóbicas. Dessa forma, a interferência com a adesão bacteriana nas superfícies dos dentes pode ser um caminho para se obter o controle do biofilme dental, e , consequentemente, se prevenir a instalação de patologias orais utilizando produtos que contenham P. cochliocarpum.

Neste estudo, o extrato da casca d e P. cochliocarpum foi efetivo na inibição da aderência das cepas utilizadas, representada pela ausência de aderência ao vidro na presença de sacarose, apresentando os melhores resultados sobre o S. sanguis , S. oralis e S. mitis , agentes importantes envolvidos nas afecções bucais. Essa atividade é representada pela ausência de aderência da bactéria à parede do tubo de vidro, demonstrando a capacidade dos extratos de inibir a síntese do glucano pela glicosiltransferase²⁴. Os resultados são promissores, uma vez que esses microrganismos também são os maiores responsáveis pela formação do biofilme bacteriano.

S. mutans estão diretamente envolvidos na etiopatogenia da cárie, doenças periodontais, estomatites e outras infecções orais por contribuírem para o desequilíbrio da microbiota oral, na medida em que criam condições favoráveis à aderência de microorganismos oportunistas às superfícies dentárias , mucosas orais e próteses²⁵. Neste estudo, o extrato de P. cochliocarpum apresentou atividade inibitória frente a cepas de S. mutans maior do que o gluconato de clorexidina.

Considerando os constituintes presentes no vegetal, a atividade antimicrobiana positiva do extrato de P. cochliocarpum frente às amostras estudadas sugere ter sido devido à presença de compostos como taninos (compostos polifenólicos), previamente encontrados na planta26, uma vez que esses compostos têm comprovada ação antimicrobiana e possuem uma ação inespecífica sobre o microrganismo, rompendo a parede celular bacteriana e inibindo os sistemas enzimáticos para a formação desta²⁷.

A resistência bacteriana frente aos antimicrobianos é considerada como um problema inerente à terapia antimicrobiana; por esse motivo, é importante buscar novas fontes terapêuticas as quais sejam mais eficazes para o tratamento de infecções, como as bacterianas²⁸. O P . cochiliocarpum é uma alternativa extremamente viável para o descobrimento de novos produtos com princípios ativos promissores, além de ser uma alternativa mais econômica no controle de doenças para países em desenvolvimento.

CONCLUSÃO

O extrato etanólico da casca de Pithecellobium cochliocarpum apresentou ação antimicrobiana significativa e atividade inibitória mínima de aderência in vitro sobre as linhagens de S. mitis , S. mutans , S. sanguis , S. oralis, S. salivares e L. casei, presentes no biofilme bacteriano supragengival, apresentando-se como opção terapêutica para as infecções orais, sendo acessível à população, uma vez que tem seu uso difundido na medicina popular.

REFERÊNCIAS

1- Corrêa, MFP, Melo GO, Costa SS. Substâncias de origem vegetal potencialmente úteis na terapia da asma. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008;18: 132-138.         [ Links ]

2- Couto G BL. Biocompatibilidade do extrato hidro-alcoólico da Lippia sidoides Cham (Verbenaceae). Revista do Conselho Regional de Odontologia de Pernambuco, 2000;3: 83-90.         [ Links ]

3- Feres M, Figueiredo LC, Barreto IM, Coelho MH, Araujo MW, Cortelli SC. In vitro antimicrobial activity of plant extracts and propolis in saliva samples of healthy and periodontally-involved subjects. Journal International Academic of Periodontology, 2005; 7: 90-96.         [ Links ]

4- Paixão CCB. Uso de plantas medicinais em pacientes portadores de afecções bucais . Odontologia Clínico-científica, 2002; 1: 1-4.         [ Links ]

5- Vendola MC C. Equinacea purpurea na odontologia. Tecnicas Esteticas, 2004; 1: 3-12.         [ Links ]

6- Albuquerque UP, Hanazaki N. As pesquisas etnodirigidas na descoberta de novos fármacos de interesse médico e farmacêutico: fragilidades e perspectivas. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2006;16: 678-689.         [ Links ]

7- Brasil. Ministério da Saúde. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Portaria nº 971, de 3 de maio de 2006.         [ Links ]

8- Silva MIG, Gondim APS, Nunes IFS, Sousa FCF 2006. Utilização de fitoterápicos nas unidades básicas de atenção à saúde da família no município de Maracanaú (CE). Rev Bras Farmacogn 16: 455-462         [ Links ]

9- Araújo C W, Peixoto Neto PAS, Campos NV, Porfírio Z, Caetano LC. Antimicrobial activity of Pithecolobium avaremotermo bark. Fitoterapia, 2002; 73:698-700.         [ Links ]

10- Santos SC, Ferreira FS, Rossi-Alva JC, Fernandez LG 2007. Atividade antimicrobiana in vitro do extrato de Abarema cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes. Rev Bras Farmacogn 17: 215-219.         [ Links ]

11- Barreto Vieira L, Feitosa Alves MSC, Araújo Teixeira J, Chagas Freire K, Costa Lima K. Acción antimicrobiana in vitro de dentífricos conteniendo fitoterápicos. Revista de Odontoestomatologia, 2005; 21: 195-201.         [ Links ]

12- Vasconcelos KRF, Veiga Júnior VF, Rocha WC, Bandeira MFCL. Avaliação in vitro da atividade antibacteriana de um cimento odontológico à base de óleo-resina de Copaifera multijuga Hayne. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008; 18 : 733-738.         [ Links ]

13 - Agra MF, França PF, Barbosa-Filho JM. Synopsis of the plants known as medicinal and poisonous in Northeast of Brazil . Revista Brasileira de Farmacognosia, 2007; 17: 114-140.         [ Links ]

14- Lustosa SR, Galindo AB, Nunes LCC, Randau KP, Rolim Neto PJ. Própolis: atualizações sobre a química e a farmacologia. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008; 18: 447-454.         [ Links ]

15- Oliveira FQ, Gobira B, Guimarães C, Batista J , Barreto M, Souza M. Espécies vegetais indicadas na odontologia. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2007; 17: 466-476.         [ Links ]

16- Soyama P. Plantas medicinais são pouco exploradas pelos dentistas. Ciência e Cultura, 2007; 59: 12-13.         [ Links ]

17- Pereira JV, Pereira MSV, Sampaio FC . Efeito antibacteriano e antiaderente in vitro do extrato da Punica granatum Linn. Sobre microrganismos do biofilme dental. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2006; 16:88-93.         [ Links ]

18- Kreuger MRO, Ternes CE, Mello LL, Cruz AB, Leite SN, Tames DR. The influence of the essential oil of Melaleuca alternifolia on the healing of infected dental alveoli: A histological study in rats. Revista. Brasileira de Farmacognosia, 2007; 17: 349-355.         [ Links ]

19- Silva MSA, Silva MAR, Higino JS, Pereira MSV, Carvalho AAT. Atividade antimicrobiana e antiaderente in vitro do extrato de Rosmarinus officinalis Linn sobre bactérias orais planctônicas. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008; 18: 236-240.         [ Links ]

20- Simões CC, Araújo DB, Araújo RPC. Estudo in vitro e in vivo da ação de diferentes concentrações de extratos de própolis frente aos microrganismos presentes na saliva de humanos. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008; 18: 84-89.         [ Links ]

21- Vasconcelos LCS, Sampaio FC, Sampaio MCC, Pereira MSV, Higino JS, Peixoto MHP. Minimum inhibitory concentration of adherence of Punica granatum Linn (pomegranate) gel against S. mutans, S. mitis and C. albicans. Brazilian Dental Journal, 2006; 17: 223-227.         [ Links ]

22- Melo AFM, Santos EJV, Souza LFC, Carvalho AAT, Pereira MSV , Higino JS. Atividade antimicrobiana in vitro do extrato de Anacardium occidentale L. sobre espécies de Streptococcus. Revista Brasileira de Farmacognosia. 2006; 16): 202-205.         [ Links ]

23- Alves PM, Pereira JV, Higino JS, Pereira MSV, Queiroz LMG. Atividade antimicrobiana e antiaderente in vitro da aroeira-do-sertão sobre o biofilme dental. Revista Brasileira de Odontologia, 2006; 63:271-4.         [ Links ]

24- Alves P MA, Queiroz LMG, Pereira JV , Pereira MSV . Atividade antimicrobiana, antiaderente e antifúngica in vitro de plantas medicinais brasileiras sobre microrganismos do biofilme dental e cepas do gênero Candida. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 2009; 42: 222-224.         [ Links ]

25- Luo G, Samaranayake LP. Candida glabrata and emerging fungal pathogen, exhibits superior relative cell surface hydrophobicity and adhesion to denture acrylic surfaces compared with Candida albicans. APMIS, 2002;110:601-610.         [ Links ]

26- IPA. Empresa Pernambucana de Pesquisas Agropecuária (Recife, PE). Rita de Cássia A. Pereira. Ex sicata n. 61336, 15 Out. 2002, 27 Set. 2005.         [ Links ]

27- Akinpelu DA. Antimicrobial activity of Anacardium occidentale bark. Fitoterapia, 2001; 72: 286-287.         [ Links ]

28- Xu HX, Lee F. Song activity of plant flavonoids against antibiotic-resistant bacteria. Phytotherapia Research, 2001; 15: 39-43.         [ Links ]

29- Agra MF, Silva KN, Basílio IJLD , França PF, Barbosa-Filho JM. Survey of medicinal plants used in the region Northeast of Brazil. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2008; 18:472-508.         [ Links ]

30- Migliatti JFZ. Barbatimão (Stryphnodendron spp., Leguminosae). Jornal Brasileiro de Fitomedicina, 2003 1: 32-35.         [ Links ]

Endereço para correspondência
Renata Patrícia Freitas Soares de Jesus
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CEP: 50.050-080

Recebido para publicação: 26/03/10
Aceito para publicação: 07/05/10

O presente artigo corresponde à parte da tese de Doutorado do Programa de Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas pela UFPE.